微生物检测

微生物检测是一种应用微生物学的方法，用来测定样品中微生物生长和繁殖状况的方法。 主要用于食品中微生物检测的试剂有平板菌落计数法、平板计数法及琼脂培养基法等。 微生物检测有许多种类，常见的包括细菌、真菌和病毒等，其中细菌是最常见的。 一般食品原料中微生物存在的状态是以菌落为单位，一般用菌落总数来表示。

微生物检测

1、平板菌落计数法

平板计数法是一种常用的快速检测方法，可直接在培养基上测定食品或原料的菌落总数。 具体操作是将待测样品放入装有液体培养基（或琼脂）的试管中，然后在一定条件下培养，直至形成稳定菌落（5~10分钟），再用分光光度计测量其波长并记录数值。 一般可按以下步骤进行：①将待测样品制成含有1个菌落的培养物。 ②在一定条件下进行测定。 ③计算出菌落计数结果，以菌落总数多少表示菌落存在的状态和数量。 平板菌落计数结果一般以5~10 （cm)/m （个）或10~20 （cm/个）为单位。 这种方法虽然速度快，但由于其培养时间较长和无法测量出培养基内所有菌落对计数结果产生影响等原因使之并不适用于食品及原料中细菌总数的直接测定及细菌总数存在菌落增加情况下对卫生要求较高的样品时。

2、平板计数法及琼脂培养基法

平板计数法又称平板划线计数法，它是根据微生物的生长速度与菌落直径成正比关系进行定量测定。 平板计数法可分为菌落计数法和数字平板计数法两类。 菌落计数法：按单位体积内每克或每毫升菌落数的计算公式，分别对各种微生物进行计数和表示。在实际工作中应用最多的是细菌计数法、真菌计数法及琼脂培养基法。 数字平板计数法主要用于食品、生物制品等样品的菌落总数测定，如需对样品进行菌落数量检验，可以采用传统的数字平板计数法，在实际工作中使用较多的是美国食品药品监督管理局（FDA）制定的数字平板计数法。 琼脂培养基法：是在传统方法基础上发展起来的一种新方法，目前广泛应用于食品、生物制品、药品及生物制品等样品中各种微生物的快速检测，其操作简便、快速，且无相应试剂盒和培养基可重复使用等优点，但对检测环境要求较高。

3、平板计数

平板计数法是用来检测食品中的微生物。 适用于食品卫生检验、药品检验以及医院药敏试验等。 优点：操作简单，方便，结果快速。 缺点：设备要求高，需专业人员操作的仪器和技术，且仪器维护、保养成本高；需要专业培训的人员进行操作。 操作：1.把新鲜原料置于密闭容器中，加水煮沸1~2 min;2.按产品配方混合均匀（每批混合应在2h内完成）；3.把混合好的样品放入沸水中加热30 min，然后放入清洁的容器中冷却1 min，再加水到指定比例，充分混合均匀；4.将样品放入平板上继续培养15 min左右；5.最后用接种到已灭菌的器皿中，并在37℃下培养48h以上。 注意事项：1.必须严格控制原料、半成品和成品中微生物污染（如大肠杆菌、酵母菌、霉菌、放线菌等）2.使用前应对产品进行充分处理。